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無菌技術(shù)是一套常規(guī)措施,旨在防止培養(yǎng)物,無菌培養(yǎng)基儲備和其他溶液受到有害微生物(即敗血癥)的污染。無菌技術(shù)控制了來自環(huán)境的微生物對培養(yǎng)物的污染或被所處理的微生物對環(huán)境的污染的機(jī)會。由于生物學(xué)家的目標(biāo)是在不引入外來生物的情況下培養(yǎng)微生物或真核細(xì)胞,因此無菌技術(shù)對于準(zhǔn)確而有意義的實驗至關(guān)重要。
無菌技術(shù)是在醫(yī)療護(hù)理操作過程中,保持無菌物品、無菌區(qū)域不被污染、防止病原微生物入侵人體的一系列操作技術(shù)。無菌技術(shù)作為預(yù)防醫(yī)院感染的一項重要而基礎(chǔ)的技術(shù),醫(yī)護(hù)人員必須正確熟練地掌握,在技術(shù)操作中嚴(yán)守操作規(guī)程,以確保病人安全,防止醫(yī)源性感染的發(fā)生。
人們應(yīng)該永遠(yuǎn)記住,不存在完全無菌的工作環(huán)境。但是,有許多簡單的常識程序可以減少培養(yǎng)物污染的風(fēng)險。盡管有時將這種行為稱為“無菌技術(shù)”,但該術(shù)語僅在防止將任何生物引入實驗室或醫(yī)療設(shè)備和試劑(例如在手術(shù)過程中)時才是適當(dāng)?shù)摹?br />
無菌操作技術(shù)主要包括兩方面:
1)創(chuàng)造無菌的培養(yǎng)環(huán)境。包括提供密閉的培養(yǎng)容器、培養(yǎng)容器的滅菌、培養(yǎng)基的滅菌等;
2)在操作和培養(yǎng)過程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外線殺菌、甲醛熏蒸、超凈臺的消毒與檢測、操作工具、器皿滅菌、操作方法等。
無菌操作原則:
1)在執(zhí)行無菌操作時,必須明確物品的無菌區(qū)和非無菌區(qū),接種時必須穿工作服、戴工作帽,應(yīng)在進(jìn)無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簦?br />
2)在操作前20~30分鐘要先啟動超凈臺和紫外燈,進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼3次后使用。嚴(yán)禁用手直接拿無菌物品,如瓶塞等,而必須用消毒的鉗、鑷子等;
3)從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不能觸及試管或平皿邊;
4)接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作,接種細(xì)菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒;
5)接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必須時還要燒到環(huán)和針與桿的連接處;
6)吸管吸取菌液或樣品時,應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。傾倒平板應(yīng)在超凈臺內(nèi)操作,并且在開啟和加蓋瓶塞時需反復(fù)用酒精燈燒。
對于任何無菌技術(shù),都應(yīng)遵循一些一般規(guī)則:
1.關(guān)閉門窗以減少氣流并防止突然移動,否則可能會干擾空氣。
2.在消毒的表面上進(jìn)行轉(zhuǎn)移。推薦使用乙醇消毒,因為其作用迅速。如果工作臺表面難以清潔,請用一塊容易消毒的堅硬材料覆蓋工作臺。
3.僅在所有設(shè)備和材料都在可及范圍內(nèi)時,才開始操作。
4.盡快完成所有操作,但不要著急。
5.船只**在**短的時間內(nèi)打開。
6.當(dāng)容器打開時,所有工作都**在本生燈附近進(jìn)行,所有燃燒器的火焰都是向上抽吸的。
7.在打開試管或瓶子時,**立即通過燃燒(請參閱下文)進(jìn)行加熱,使容器保持在盡可能接近水平的位置,以使空氣從容器中向外排出。
8.在進(jìn)行皮氏培養(yǎng)皿操作時,應(yīng)將無菌內(nèi)表面暴露在空氣中。
9.不得觸摸將要移入培養(yǎng)物或無菌容器的無菌移液器零件,或使其與其他非無菌表面接觸,例如衣物,工作區(qū)域表面或瓶子/試管的外部。
10.與微生物接觸的所有物品在每次暴露之前和之后都**進(jìn)行消毒。這可以由技術(shù)團(tuán)隊在完成一項實際工作后進(jìn)行準(zhǔn)備和清理(例如,對于要使用的玻璃器皿),也可以由工作人員在進(jìn)行實際工作期間進(jìn)行(例如,對火爐進(jìn)行燃燒)。線環(huán))。
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